16S、18S、ITS等扩增子测序

产品介绍常见问题经典案例结果展示


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经典案例

Tfh细胞通过识别细菌产生的胞外ATP以促进形成

有益于宿主代谢稳态的肠道生态系统

T Follicular Helper Cells Promote a Beneficial Gut Ecosystem for Host Metabolic Homeostasis by
Sensing Microbiota-Derived Extracellular ATP

期刊:Cell Reports
影响因子:8.28
发表单位:Institute for Research in Biomedicine, Universita` della Svizzera Italiana
发表年份:2017年3月

一、研究背景

哺乳动物的肠道微生物能调节宿主的脂肪存储,研究表明肠道中的Tfh细胞能控制IgA的分泌,缺乏P2X7的小鼠导致IgA分泌增加,本文是在缺乏P2X7的小鼠基础上,研究肠道微生物以及代 谢情况。

二、方法流程

取材

C57BL/6J, P2rx7 -/-
Icos-/-和Cd3e-/-小鼠

建库

构建小片段文库

测序

盲肠样本 16S rRNA V5–V6
1. WT, P2rx7-/-, Icos-/-, 和
Icos-/-P2rx7-/-
Illumina MiSeq platform
2. Tfh细胞转移后的微生物研究
Ion Torrent PGM

分析

1. OTU聚类和分析
2. α-多样性
3. β-多样性
4. 小鼠体重、肺部组织肿瘤形态
    以及组织切片观察、血清中淋
    巴细胞数量检测等

三、研究结果

1.缺失P2X7的小鼠体重和微生物变化

P2rx7-/-小鼠的体重增加和葡萄糖代谢受损;P2rx7-/-小鼠改变了肠道的微生物, 且富集了Lachnospiraceae(与肥胖有关)和Helicobacteraceae,P2rx7-/-小 鼠中与肥胖相关的短链脂肪酸(SCFAs)也增加。

2. Tfh细胞调节葡萄糖代谢和微生物组成

通过测定WT和P2rx7-/-中Tfh细胞转移到Cd3e-/-小鼠,万古霉素、氨苄西林、甲硝哒唑 (VAM)处理小鼠,以及移植P2rx7-/-小鼠盲肠的内容物前后小鼠的各种指标的变化,发现 P2rx7-/-小鼠导致脂肪沉积和代谢功能异常,粪便移植恢复Tfh细胞丰度,Tfh细胞通过控制 IgA的分泌来促进产生健康的肠道微生态。

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四、研究结论

Tfh细胞中的P2X7受体对于塑造肠道微生物群是很重要的,缺乏P2X7导致肠道中致肥胖的微生物选择性增加,Tfh细胞控制IgA的分泌来促进产生健康的肠道微生态,且P2X7受体识别细菌产 生的ATP,从而促进形成有利于宿主代谢稳态的肠道生态系统。